Biopolym. Cell. 2016; 32(2):105-110.
Структура и функции биополимеров
Phospho-mTOR (Ser2481) колокализируется с конденсированными хромосомами в метафазе
1Косач В. Р., 1Тихонкова И. А., 1Чередник О. В., 1Филоненко В. В., 1Хоруженко А. И.
  1. Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины
    ул. Академика Заболотного, 150, Киев, Украина, 03680

Abstract

Цель. Исследовать внутриклеточную локализацию phospho-mTOR (Ser2481) в раковых клеточных линиях человека. Методы. Двойной иммунофлуоресцентный анализ. Культивированные клетки линий MCF-7 (аденокарцинома молочной железы человека) и HepG2 (карцинома печени человека). Результаты. Впервые phospho-mTOR (Ser2481) был обнаружен в виде ярких точек, которые располагались в экваториальной области клетки и колокализировались с конденсированными хромосомами во время метафазы. Выводы. В этом исследовании мы впервые описываем колокализацию phospho-mTOR (Ser2481) и хромосом метафазной пластинки в клетках линий MCF-7 и HepG2. Наши данные подкрепляют гипотезу, что phospho-mTOR (Ser2481) может выступать в качестве СРР-киназы и участвовать в регуляции прохождения митоза.
Keywords: mTOR, phospho-mTOR (Ser2481), митоз, фосфорилирование mTOR, метафаза

References

[1] Laplante M, Sabatini DM. mTOR signaling in growth control and disease. Cell. 2012;149(2):274-93.
[2] Pópulo H, Lopes JM, Soares P. The mTOR signalling pathway in human cancer. Int J Mol Sci. 2012;13(2):1886-918.
[3] Zoncu R, Efeyan A, Sabatini DM. mTOR: from growth signal integration to cancer, diabetes and ageing. Nat Rev Mol Cell Biol. 2011;12(1):21-35.
[4] Groban ES, Narayanan A, Jacobson MP. Conformational changes in protein loops and helices induced by post-translational phosphorylation. PLoS Comput Biol. 2006;2(4):e32.
[5] Edwards AS, Faux MC, Scott JD, Newton AC. Carboxyl-terminal phosphorylation regulates the function and subcellular localization of protein kinase C betaII. J Biol Chem. 1999;274(10):6461-8.
[6] Maddika S, Ande SR, Wiechec E, Hansen LL, Wesselborg S, Los M. Akt-mediated phosphorylation of CDK2 regulates its dual role in cell cycle progression and apoptosis. J Cell Sci. 2008;121(Pt 7):979-88.
[7] Acosta-Jaquez HA, Keller JA, Foster KG, Ekim B, Soliman GA, Feener EP, Ballif BA, Fingar DC. Site-specific mTOR phosphorylation promotes mTORC1-mediated signaling and cell growth. Mol Cell Biol. 2009;29(15):4308-24.
[8] Watanabe R, Wei L, Huang J. mTOR signaling, function, novel inhibitors, and therapeutic targets. J Nucl Med. 2011;52(4):497-500.
[9] Peterson RT, Beal PA, Comb MJ, Schreiber SL. FKBP12-rapamycin-associated protein (FRAP) autophosphorylates at serine 2481 under translationally repressive conditions. J Biol Chem. 2000;275(10):7416-23.
[10] Vazquez-Martin A, Oliveras-Ferraros C, Bernadó L, López-Bonet E, Menendez JA. The serine 2481-autophosphorylated form of mammalian Target Of Rapamycin (mTOR) is localized to midzone and midbody in dividing cancer cells. Biochem Biophys Res Commun. 2009;380(3):638-43.
[11] Vazquez-Martin A, Sauri-Nadal T, Menendez OJ, Oliveras-Ferraros C, Cufí S, Corominas-Faja B, López-Bonet E, Menendez JA. Ser2481-autophosphorylated mTOR colocalizes with chromosomal passenger proteins during mammalian cell cytokinesis. Cell Cycle. 2012;11(22):4211-21.
[12] Khoruzhenko A, Kukharchuk V, Cherednyk O, Tykhonkova I, Ovcharenko G, Malanchuk O, Filonenko V. Monoclonal antibodies to Ki-67 protein suitable for immunohistochemical analysis. Hybridoma (Larchmt). 2010;29(4):301-4.
[13] Hall MN, Tamanoi F. Structure, function and regulation of tor complexes from yeasts to mammals. Amsterdam: Academic Press, Elsevier, 2010: 27–8.
[14] Filonenko VV. PI3K/mTOR/S6K signaling pathway – new players and new functional links. Biopolym Cell. 2013; 29(3):207–14.
[15] Kosach VR, Cherednyk OV, Khoruzhenko AI. Characteristic of mTOR signaling and its involvement in the regulation of cell movements through remodeling the cytoskeleton architecture. Biopolym Cell. 2015; 31(1):5–14.
[16] Copp J, Manning G, Hunter T. TORC-specific phosphorylation of mammalian target of rapamycin (mTOR): phospho-Ser2481 is a marker for intact mTOR signaling complex 2. Cancer Res. 2009;69(5):1821-7.
[17] Soliman GA, Acosta-Jaquez HA, Dunlop EA, Ekim B, Maj NE, Tee AR, Fingar DC. mTOR Ser-2481 autophosphorylation monitors mTORC-specific catalytic activity and clarifies rapamycin mechanism of action. J Biol Chem. 2010;285(11):7866-79.
[18] Carmena M, Wheelock M, Funabiki H, Earnshaw WC. The chromosomal passenger complex (CPC): from easy rider to the godfather of mitosis. Nat Rev Mol Cell Biol. 2012;13(12):789-803.