Білковий блотинг

Автор(и)

  • Б. А. Маргуліс Інститут цитології АН СРСР Ленінград, СРСР Автор

DOI:

https://doi.org/10.7124/bc.0001BD

Анотація

Метод білкового блотингу активно використовується в молекулярно-біологічних дослідженнях для аналізу взаємодій типу білок–ДНК і білок–білок, включаючи визначення специфічності антигенів і антитіл. Розглянуто різні етапи блотингу – перенесення білків на мембрани, обробка блотів, створення імунних комплексів на репліках і фарбування блотів. Представлено два приклади застосування імуноблотингу для аналізу специфічності антитіл до інтерферонів людини.

Посилання

Osterman LA. The study of biological macromolecules electrofocussing, immunoelectrophoresis and radioisotope methods. Moscow, Nauka, 1983; 304 p.

Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.

O'Farrell PH. High resolution two-dimensional electrophoresis of proteins. J Biol Chem. 1975;250(10):4007-21.

Chromatography. Electrophoresis. Immunochemistry: BioRad Catalogue K1985. Richmond : BioRad Lab., 1985. 256 p.

Products for nucleic acids and protein research: Schleicher and Schull Catalogue. Dassel : Schleicher and Schull, 1982. 11 p.

Aubertin AM, Tondre L, Lopez C, Obert G, Kirn A. Sodium dodecyl sulfate-mediated transfer of electrophoretically separated DNA-binding proteins. Anal Biochem. 1983;131(1):127-34.

Reinhart MP, Malamud D. Protein transfer from isoelectric focusing Gels: the native blot. Anal Biochem. 1982;123(2):229-35.

Towbin H, Staehelin T, Gordon J. Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications. Proc Natl Acad Sci U S A. 1979;76(9):4350-4.

Manabe T, Takahashi Y, Okuyama T. An electroblotting apparatus for multiple replica technique and identification of human serum proteins on micro two-dimensional gels. Anal Biochem. 1984;143(1):39-45.

Moeremans M, Daneels G, Van Dijck A, Langanger G, De Mey J. Sensitive visualization of antigen-antibody reactions in dot and blot immune overlay assays with immunogold and immunogold/silver staining. J Immunol Methods. 1984;74(2):353-60.

Heggeness MH, Ash JF. Use of the avidin-biotin complex for the localization of actin and myosin with fluorescence microscopy. J Cell Biol. 1977;73(3):783-8.

Wojtkowiak Z, Briggs RC, Hnilica LS. A sensitive method for staining proteins transferred to nitrocellulose sheets. Anal Biochem. 1983;129(2):486-9.

Faye L, Chrispeels MJ. Characterization of N-linked oligosaccharides by affinoblotting with concanavalin A-peroxidase and treatment of the blots with glycosidases. Anal Biochem. 1985;149(1):218-24.

Handman E, Jarvis HM. Nitrocellulose-based assays for the detection of glycolipids and other antigens: mechanism of binding to nitrocellulose. J Immunol Methods. 1985;83(1):113-23.

Loeb MR. Immunoblot method for identifying surface components, determining their cross-reactivity, and investigating cell topology: results with Haemophilus influenzae type b. Anal Biochem. 1984;143(1):196-204.

Grace AM, Strauss AW, Sobel BE. Sensitive quantification of isoforms of canine MM creatine kinase with an immunoblot procedure suitable for large numbers of samples. Anal Biochem. 1985;149(1):209-17.

King SM, Otter T, Witman GB. Characterization of monoclonal antibodies against Chlamydomonas flagellar dyneins by high-resolution protein blotting. Proc Natl Acad Sci U S A. 1985;82(14):4717-21.

Legocki RP, Verma DP. Multiple immunoreplica Technique: screening for specific proteins with a series of different antibodies using one polyacrylamide gel. Anal Biochem. 1981;111(2):385-92.

Parekh BS, Mehta HB, West MD, Montelaro RC. Preparative elution of proteins from nitrocellulose membranes after separation by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Anal Biochem. 1985;148(1):87-92.

Anderson PJ. The recovery of nitrocellulose-bound protein. Anal Biochem. 1985;148(1):105-10.

Roberts PL. Comparison of fluorographic methods for detecting radioactivity in polyacrylamide gels or on nitrocellulose filters. Anal Biochem. 1985;147(2):521-4.

Lin W, Kasamatsu H. On the electrotransfer of polypeptides from gels to nitrocellulose membranes. Anal Biochem. 1983;128(2):302-11.

Jahn R, Schiebler W, Greengard P. A quantitative dot-immunobinding assay for proteins using nitrocellulose membrane filters. Proc Natl Acad Sci U S A. 1984;81(6):1684-7.

Завантаження

Опубліковано

1986-09-20

Номер

Розділ

Структура та функції біополімерів