Модельна система in vitro для вивчення репарації двонитчастих розривів ДНК екстрактами з вищих рослин
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.0002EAАнотація
Запропоновано модельну систему in vitro для вивчення репарації дволанцюгових розривів у ДНК за участю білкових екстрактів із вищих рослин. Система базується на дослідженні можливості гомологічної рекомбінації між двома лінійними фрагментами Д НК плазміди pUC19. Результатом проходження процесу рекомбінації є відновлення структурної цілісності гену IacZ плазміди pUC19 і як наслідок–блакитного забарвлення рекомбінантів, що ростуть в присутності ІПТГ та Z-gal. Дволанцюговий розрив у плазмідній ДНК моделювався за допомогою рестриктаз EcoRI і BglI. Обговорюються також можливі варіанти репарації в даній системі лігіюванням субстратів чи їх негомологічною рекомбінацією.Посилання
Tarasov VA. Molecular mechanisms of repair and mutagenesis. M.: Nauka, 1982. 226 p.
Zheyetyannikov VD. Genetics repair processes in microorganisms. Results of science and technology. VINITI, (Ser Mikrobiologiia, V. 15) 1985:5-149.
Veleminsky J, Gichner T, Satava J. Reduction in the frequency of N-methyl-N-nitrosourea-induced somatic mutations in Tradescantia by pretreatment with low doses of alkylating agents. Mutat Res. 1983;122(2):229-34.
Stepanyan NS, Seregina TB, Krupnova GF, Zhestyanikov VD. Recovery of cytogenetic damage in plant cells with unequal fractionation damaging action. II. Sparsely ionizing radiation effect. Tsitologiia. 1984;26(3):307-15.
Rieger R, Michaelis A, Nicoloff H. Inducible repair processes in plant root tip meristems? “Below additivity effects” of unequally fractionated clastogen concentrations. Biol Zent Bl. 1982;101(1):125–38.
Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.
Hanahan D. Studies on transformation of Escherichia coli with plasmids. J Mol Biol. 1983;166(4):557-80.
Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.
