Вбудування фрагмента ДНК між двома сильними односпрямованими промоторами рекомбінантного ниткоподібного фага mp8t0/rpoB збільшує його стабільність і робить можливою протилежну орієнтацію у ньому клонованого гена rpoB E. coli
DOI:
https://doi.org/10.7124/bc.0001C3Анотація
У полілінкерную область ниткоподібного фага М13 mp8 вбудовано фрагмент ДНК фага λ, що включає термінатор транскрипції t0 і кінцеву частину гена oop-РНК. Отриманий фаг використано для клонування BglII-фрагмента косміди pJС703, що містить гени Е. coli rpIJ, rpIL і rpoВ з промоторами РJ і Рb. Показано, що стабільність отриманих в результаті цього рекомбінантних фагів mр8t0/rроВ підвищилася до 93 % і стала можливою протилежна раніше спостережуваній орієнтація клонованого BglII-фрагмента.Посилання
Paton EB, Vudmaska MI, Sverdlov ED. Unidirectional orientation of the rpo B gene of E. coli cloned into filamentous M13mp8 and M13WB2348 phages. Bioorg Khim. 1984;10(11):1544-7.
Paton EB, Vudmaska MI, Sverdlov ED. Unidirectional orientation of the rpoB gene of E. coli, cloned in filamentous phage Ml3. Macromolecules in the functioning cell: Proc. of reports IV sympos. USSR - Italy. Kiev, 1984; 89.
Paton EB, Woodmaska MI, Sverdlov ED. The stability of recombinant filamentous phages is reduced in the presence of the rpoB gene promoter. Biopolym Cell. 1985; 1(3):160-2.
Gentz R, Langner A, Chang AC, Cohen SN, Bujard H. Cloning and analysis of strong promoters is made possible by the downstream placement of a RNA termination signal. Proc Natl Acad Sci U S A. 1981;78(8):4936-40.
Ovchinnikov YA, Guryev SO, Krayev AS, Monastyrskaya GS, Skryabin KG, Sverdlov ED, Zakharyev VM, Bayev AA. Primary structure of an EcoRI fragment of lambda imm434 DNA containing regions cI-cro of phage 434 and cII-o of phage lambda. Gene. 1979;6(3):235-49.
Dretzen G, Bellard M, Sassone-Corsi P, Chambon P. A reliable method for the recovery of DNA fragments from agarose and acrylamide gels. Anal Biochem. 1981;112(2):295-8.
Maniatis T., Fritsch E. F., Sambrook J. Molecular cloning - a laboratory manual. New York : Cold Spring Harbor, 1982. 545 p.
Miller JH. Experiments in molecular genetics. Cold Spring Harbor Laboratory, 1972, 466 p.
Beck E, Zink B. Nucleotide sequence and genome organisation of filamentous bacteriophages fl and fd. Gene. 1981;16(1-3):35-58.
Collins J. Deletions, insertions and rearrangements affecting rpoB gene expression. Mol Gen Genet. 1979;173(2):217-20.
