Biopolym. Cell. 1991; 7(4):104-108.
Клеточная биология
Модельная система in vitro для изучения репарации двунитчатых разрывов ДНК экстрактами из высших растений
1Ситайло Л. А., 1Науменко В. Д., 1Макарова В. Г., 1Каневский И. Ф., 1Бубряк И. И.
  1. Институт клеточной биологии и генетической инженерии АН УССР
    Киев, СССР

Abstract

Предложена модельная система in vitro для изучения репарации двухцепочечных разрывов в ДНК с участием белковых экстрактов из высших растений. Система основана на исследовании возможности гомологической рекомбинации между двумя линейными фрагментами ДНК плазмиды pUC19. Результатом протекания процесса рекомбинации является восстановление структурной целостности гена IacZ плазмиды pUC19 и как следствие – голубой окраски рекомбинантов, растущих на среде с ИПТГ u Z-gal. Двухцепочечный разрыв в плазмидной ДНК моделировался с помощью рестриктаз EcoRI и BglI. Обсуждаются также возможные варианты репарации в данной системе лигированием субстратов или их негомологической рекомбинацией.

References

[1] Tarasov VA. Molecular mechanisms of repair and mutagenesis. M.: Nauka, 1982. 226 p.
[2] Zheyetyannikov VD. Genetics repair processes in microorganisms. Results of science and technology. VINITI, (Ser Mikrobiologiia, V. 15) 1985:5-149.
[3] Veleminsky J, Gichner T, Satava J. Reduction in the frequency of N-methyl-N-nitrosourea-induced somatic mutations in Tradescantia by pretreatment with low doses of alkylating agents. Mutat Res. 1983;122(2):229-34.
[4] Stepanyan NS, Seregina TB, Krupnova GF, Zhestyanikov VD. Recovery of cytogenetic damage in plant cells with unequal fractionation damaging action. II. Sparsely ionizing radiation effect. Tsitologiia. 1984;26(3):307-15.
[5] Rieger R, Michaelis A, Nicoloff H. Inducible repair processes in plant root tip meristems? “Below additivity effects” of unequally fractionated clastogen concentrations. Biol Zent Bl. 1982;101(1):125–38.
[6] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.
[7] Hanahan D. Studies on transformation of Escherichia coli with plasmids. J Mol Biol. 1983;166(4):557-80.
[8] Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970;227(5259):680-5.
[9] Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 1976;72:248-54.