Biopolym. Cell. 2014; 30(6):481-484.
Краткие сообщения
Ионы Ca2+ не влияют на связывающие свойства ЕН-доменов ITSN1
1Мордерер Д. Е., 1Рымаренко О. В., 1Скрипкина И. Я., 1Рындич А. В.
  1. Государственная ключевая лаборатория молекулярной и клеточной биологии
    Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины
    ул. Академика Заболотного, 150, Киев, Украина, 03680

Abstract

ITSN1 – адапторный белок эндоцитоза, вовлеченный в функционирование синапсов. Известно, что ионы Ca2+ важны для эндоцитоза в пре- и постсинаптических окончаниях. ITSN1 имеет два ЕН-домена, гомологичных Eps15, которые содержат предсказанные Ca2+-связывающие мотивы EF-hand. Цель. Проверить эффект ионов Ca2+ на связывающие свойства доменов ЕН. Методы. Преципитация белков, слитых с His-тагом, Вестерн-блот- гибридизация. Результаты. Показано, что добавление 1,5 мМ Ca2+ не влияет на связывание ЕН-доменами ITSN1 С-концевого фрагмента белка эндоцитоза Эпсина 1. Выводы. Полученные данные свидетельствуют об отсутствии эффекта ионов Ca2+ на связывающие свойства ЕН-доменов ITSN1.
Keywords: ITSN1, ионы Ca2+, EH-домены

References

[1] Tsyba LO, Dergai MV, Skrypkina IYa, Nikolaienko OV, Dergai OV, Kropyvko SV, Novokhatska OV, Morderer DYe, Gryaznova TA, Gubar OS, Rynditch AV. ITSN protein family: regulation of diversity, role in signalling and pathology. Biopolym Cell. 2013; 29(3):244-51.
[2] Sengar AS, Wang W, Bishay J, Cohen S, Egan SE. The EH and SH3 domain Ese proteins regulate endocytosis by linking to dynamin and Eps15. EMBO J. 1999;18(5):1159-71.
[3] Martin NP, Mohney RP, Dunn S, Das M, Scappini E, O'Bryan JP. Intersectin regulates epidermal growth factor receptor endocytosis, ubiquitylation, and signaling. Mol Pharmacol. 2006;70(5):1643-53.
[4] Koh TW, Verstreken P, Bellen HJ. Dap160/intersectin acts as a stabilizing scaffold required for synaptic development and vesicle endocytosis. Neuron. 2004;43(2):193-205.
[5] Piper R, Bryant N. Posttranslational control of protein trafficking in the post-golgi secretory and endocytic pathway. Trafficking inside cells: pathways, mechanisms and regulation. Ed. N. Segev. New York, Springer, 2009; 363–87.
[6] Glodowski DR, Chen CC, Schaefer H, Grant BD, Rongo C. RAB-10 regulates glutamate receptor recycling in a cholesterol-dependent endocytosis pathway. Mol Biol Cell. 2007;18(11):4387-96.
[7] Kostyuk PG. Key role of calcium signaling in synaptic transmission. Neurophysiology. 2007;39(4–5):248–50.
[8] Marks B, McMahon HT. Calcium triggers calcineurin-dependent synaptic vesicle recycling in mammalian nerve terminals. Curr Biol. 1998;8(13):740-9.
[9] Kropyvko SV, Tsyba LO, Skrypkina IYa, Rynditch AV. Identification and functional analysis of an alternative promoter of human intersectin 1 gene. Biopolym Cell. 2010; 26(2):115-20.
[10] Yamabhai M, Hoffman NG, Hardison NL, McPherson PS, Castagnoli L, Cesareni G, Kay BK. Intersectin, a novel adaptor protein with two Eps15 homology and five Src homology 3 domains. J Biol Chem. 1998;273(47):31401-7.
[11] Horvath CA, Vanden Broeck D, Boulet GA, Bogers J, De Wolf MJ. Epsin: inducing membrane curvature. Int J Biochem Cell Biol. 2007;39(10):1765-70.
[12] Confalonieri S, Di Fiore PP. The Eps15 homology (EH) domain. FEBS Lett. 2002;513(1):24-9.
[13] Lewit-Bentley A, R?ty S. EF-hand calcium-binding proteins. Curr Opin Struct Biol. 2000;10(6):637-43.
[14] Nikolaienko O1, Skrypkina I, Tsyba L, Fedyshyn Y, Morderer D, Buchman V, de la Luna S, Drobot L, Rynditch A. Intersectin 1 forms a complex with adaptor protein Ruk. CIN85 in vivo independently of epidermal growth factor stimulation. Cell Signal. 2009; 21(5):753–9.
[15] Kelly LE, Phillips AM. Molecular and genetic characterization of the interactions between the Drosophila stoned-B protein and DAP-160 (intersectin). Biochem J. 2005;388(Pt 1):195-204.
[16] Morderer DYe, Nikolaienko OV, Skrypkina IYa, Rymarenko OV, Kropyvko S.V, Tsyba LO, Rynditch AV. Ca/calmodulin-dependent phosphorylation of endocytic scaffold ITSN1. Biopolym Cell. 2014; 30(1):74-6.