Biopolym. Cell. 2014; 30(5):394-399.
Молекулярная и клеточная биотехнологии
Сравнительное исследование влияния фетальной сыворотки телят и сыворотки взрослых крыс на культивирование нервных клеток новорожденных крыс
1, 2Сукач А. Н., 1Шевченко М. В., 2Ляшенко Т. Д.
  1. Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины
    23, Переяславская ул., Харьков, Украина, 61015
  2. Харьковский национальный педагогический университет имени Г. С. Сковороды
    ул. Артема, 29, Харьков, Украина, 61002

Abstract

Цель. Изучение влияния фетальной сыворотки телят и сыворотки взрослых крыс на поведение изолированных нервных клеток новорожденных крыс при культивировании in vitro. Методы. Выделение нервных клеток из головного мозга новорожденных крыс; культивирование; определение динамики образования монослоя клеток; иммуноцитохимическое окрашивание клеток на присутствие β-тубулина III, нестина и виментина. Результаты. Установлено, что добавление сыворотки взрослых крыс в среду культивирования создает более благоприятные условия для выживания, прикрепления и распластывания дифференцированных клеток, а также для пролиферации стволовых/прогениторных нервных клеток новорожденных крыс в процессе культивирования in vitro по сравнению с внесением фетальной сывороткой телят. Выводы. Использование сыворотки взрослых крыс более предпочтительно при культивировании изолированных нервных клеток новорожденных крыс, чем фетальной сыворотки телят.
Keywords: нервные клетки, новорожденные крысы, культивирование, фетальная сыворотка телят, сыворотка крови взрослых крыс.

References

[1] Masters JRW. Animal Cell Culture. A Practical Approach. 3rd Ed. Oxford University Press, 2000; 315 p.
[2] Pajtler K, Bohrer A, Maurer J, Schorle H, Schramm A, Eggert A, Schulte JH. Production of chick embryo extract for the cultivation of murine neural crest stem cells. J Vis Exp. 2010;(45). pii: 2380.
[3] Rauch C, Feifel E, Amann EM, Sp?tl HP, Schennach H, Pfaller W, Gstraunthaler G. Alternatives to the use of fetal bovine serum: human platelet lysates as a serum substitute in cell culture media. ALTEX. 2011;28(4):305-16.
[4] Gstraunthaler G. Alternatives to the use of fetal bovine serum: serum-free cell culture. ALTEX. 2003;20(4):275-81.
[5] Davis J. M. Basic Cell Culture. A Practical Approach. 2nd Ed. Oxford University Press, 2002; 381 p.
[6] van der Valk J, Mellor D, Brands R, Fischer R, Gruber F, Gstraunthaler G, Hellebrekers L, Hyllner J, Jonker FH, Prieto P, Thalen M, Baumans V. The humane collection of fetal bovine serum and possibilities for serum-free cell and tissue culture. Toxicol In Vitro. 2004;18(1):1-12.
[7] Price PJ, Gregory EA. Relationship between in vitro growth promotion and biophysical and biochemical properties of the serum supplement. In Vitro. 1982;18(6):576-84.
[8] Obukhova LM, Deryugina AV, Nikiforova ON. Species differences in vertebrate blood serum structural macroportrait. Vestnik of Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod. 2011; 2(2):287–93.
[9] Petrenko AYu, Sukach AN. Isolation of intact mitochondria and hepatocytes using vibration. Anal Biochem. 1991;194(2):326-9.
[10] Seglen PO. Preparation of isolated rat liver cells. Methods Cell Biol. 1976;13:29-83.
[11] Moscona A. Rotation-mediated histogenetic aggregation of dissociated cells. A quantifiable approach to cell interactions in vitro. Exp Cell Res. 1961;22:455-75.
[12] Sukach AN. Characteristics of human embryonic neuronal cells procured by non-enzyme method. Tsitologiia. 2005;47(3):207-13.
[13] Sukach AN, Liashenko TD, Shevchenko MV. Properties of isolated neural cells from newborn rat tissue in vitro. Biotechnologia Acta. 2013;6(3):63–8.