Biopolym. Cell. 2001; 17(2):160-165.
Молекулярная и клеточная биотехнологии
Отбор чувствительных к бактериофагу λ клонов из устойчивого к нему штамма Escherichia coli
1Славченко И. Ю.
  1. Институт молекулярной биологии и генетики НАН Украины
    ул. Академика Заболотного, 150, Киев, Украина, 03680

Abstract

Теоретически сформулирован и экспериментально апробирован метод селекции чувствительных к фагу λ клонов из популяции клеток, устойчивых к бактериофагу λ с помощью фага λcI857ApRTcR Устойчивый к фагу λ штамм Е. coli инфицировали фагом λ, который привносит в клетку маркеры антибиотикоустойчивости. На селективной среде отобраны клоны, чувствительные к фагу λ vir и лизирующие при температуре 43 °С. Частота возникновения таких клеток в популяции составила 10–6. Наличие ts-мутации в cI-гене фага позволило при выращивании несущих его клеток в неселективных условиях при повышенной температуре излечить клетки от фага λcI857ApRTcR и получить чувствительные к фагу λ клоны, производные исходного нечувствительного штамма Е. coli Метод также может быть использован для популяционных оценок гетерогенности популяций Е. coli по данному признаку.

References

[1] Moir A, Brammar WJ. The use of specialised transducing phages in the amplification of enzyme production. Mol Gen Genet. 1976;149(1):87-99.
[2] Drew RE, Clarke PH, Brammar WJ. The construction in vitro of derivatives of bacteriophage lambda carrying the amidase genes of Pseudomonas aeruginosa. Mol Gen Genet. 1980;177(2):311-20.
[3] AS. USSR N 1593232 Al. A method of producing ?-galactosidase. VA Kordyum, SI Chernykh, IYu Slavchenko, VG Korobko. 15.05.1990.
[4] Maniatis T, Fritsch EF, Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Lab, 1982; 545 p.
[5] Slavchenko IIu, Chernykh SI, Kordium VA. [The use of the mutant phage lambda cI857 ApRTcRN- for isolation of cells lacking the prophage lambda]. Mol Gen Mikrobiol Virusol. 1985;(11):42-4.
[6] Pat. USA 4,784,952. Conferred susceptibility to lambda phage in non-coliform prokaryotic hosts. Robert A. Ludwig, Gert E. de Vries. Publ. 15.11.88.
[7] Chernykh SI, Stel'mashenko LN, Kordium VA. [Characteristics of the expression of the Ap- and Tc-genes of plasmid origin in lambda vectors]. Genetika. 1984;20(3):382-8.
[8] Kravchenko VV, Guileva IP, Shamin VV, Kulichkov VA, Dobrynin VN, Filippov SA, Chuvpilo SA, Korobko VG. Construction of a tandem of artificial genes encoding human leukocyte interferon and its expression as a part of polycistronic template with coupled translation. Bioorg Khim. 1987; 13 (9):1186-93.
[9] Kashyap SK, Bystrov NS, Boldyreva EF, Polyakova IA, Severtsova IV, Korobko VG. Chemical-enzymatic synthesis and cloning in Escherichia coli of genes coding for human granulocyte colony stimulating. Bioorg Khim. 1992; 18(1):71-7